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血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但是由于血清成分十分復雜，直至今天，血清中的所有成分仍未wan全分析出來(lái)，且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的性別、年齡、生理條件和營(yíng)養條件不同而發(fā)生改變。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。
牛血清的區別
牛血清是細胞培養中重要的天然培養基，含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份，常用于動(dòng)物細胞的體外培養。可以劃分為：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清。
? 胎牛血清（Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)FBS）：胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后，發(fā)育未wan全的胎牛心臟密閉穿刺采血后，通過(guò)一系列工藝處理最終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(cháng)發(fā)育因子，一旦胚胎發(fā)育wan全這些因子會(huì )自動(dòng)消失。
? 新生牛血清（Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS）：出生14小時(shí)內未進(jìn)食的新生牛，通常采用頸動(dòng)脈采集血液分離得到的血清。
?小牛血清(Calf serum, CS)：取自出生后3天至6個(gè)月的健康小牛，動(dòng)脈采血分離血清；
?成牛血清（Adult Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)ABS）：取自健康的成年牛，收全血后分離得到血清。
胎牛血清是品質(zhì)相對較高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。
某些細胞必需胎牛血清才能生長(cháng)，而有些細胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。
牛血清的保存
未拆封的牛血清，一般情況下應存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規定的效期內均可使用，若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內，再放回冷凍。
牛血清在放入冷凍環(huán)境前，建議瓶中預留一定的體積空間，避免血清凍結后體積增大，撐破包裝瓶，形成污染。
牛血清的使用
將牛血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。wan全溶解后建議盡快使用，若長(cháng)時(shí)間儲存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。
牛血清的沉淀處理
牛血清中沉淀物的出現有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì )存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會(huì )阻塞您的過(guò)濾膜。
解凍牛血清時(shí)，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì )變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩定的成分也會(huì )因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。
牛血清中的“黑膠蟲(chóng)"
在細胞培養的時(shí)候，有時(shí)會(huì )在400倍顯微鏡下看到小黑點(diǎn)在動(dòng)，小黑點(diǎn)有時(shí)呈點(diǎn)狀，有時(shí)呈小的片狀，運動(dòng)形式為在原地振動(dòng)，類(lèi)似布朗運動(dòng)，這種小黑點(diǎn)既不是細菌、霉菌，也不是支原體，目前業(yè)內人士稱(chēng)其為“黑膠蟲(chóng)"。
黑膠蟲(chóng)究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議。黑膠蟲(chóng)一般是存在血清里的，而血清通常是經(jīng)過(guò)0.1μm濾膜過(guò)濾的，所以血清里不可能存在細菌、霉菌及支原體等微生物。如果說(shuō)黑膠蟲(chóng)不是生物，它會(huì )不斷增多，達到一定數量時(shí)會(huì )與細胞競爭性生長(cháng)，與細胞競爭培養基中的營(yíng)養，從而使得細胞營(yíng)養不足而死亡。
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